Single molecule real time sequencing とは

単一分子リアルタイムシークエンシング(SMRT)は、並列化された単一分子DNA配列決定法である。単一分子リアルタイムシーケンシングは、ゼロモード導波路(ZMW)を利用する。単一のDNAポリメラーゼ酵素が、単一のDNA分子を鋳型としてZMWの底に固定されている。 ZMWは、DNAポリメラーゼによって取り込まれるDNAの単一のヌクレオチドのみを観察するのに十分小さい照射された観察体積を生成する構造である。 4つのDNA塩基の各々は、4つの異なる蛍光色素のうちの1つに結合される。ヌクレオチドがDNAポリメラーゼによって取り込まれると、蛍光タグは切断され、その蛍光がもはや観察されないZMWの観察領域から拡散する。検出器がヌクレオチド取り込みの蛍光シグナルを検出し、塩基呼び出しが色素の対応する蛍光に従って行われる。